随着分子生物学研究逐步普及,全自动凝胶成像分析系统在国内的需求在不断增长不管是什么用途,凝胶成像系统的组件都是相似的。都有一个拍摄系统、一个带有特殊光源的暗箱与获取和分析凝胶图片的软件组成。”但是,大部分凝胶成像系统提供了不同的产品特性来满足不同科学研究的需要。快速发展的电子技术、光学技术和成像分析软件使成像操作越趋人性化。下面我们对全自动凝胶成像分析系统的各种光源及其用途做简要介绍:
1、双侧反射白光光源,也是我们使用zui多的光源,通常作为系统照明光源使用,即放置或调整DNA胶或蛋白胶位置,或在对镜头调整聚焦时使用,当然在对非透明材质的蛋白胶或其他成像物质进行成像时也需开启反射白光。
2、透射白光,即通常所说白光板,主要用于蛋白质胶拍摄时使用,因为白光板位于透射紫外灯箱上方,所以为不影响透射紫外光源的使用,同时也更节约室内空间,白光板一般可以折叠竖立在箱体后部。
3、全自动凝胶成像分析系统透射紫外光源,即紫外透射灯箱,主要用于DNA胶拍摄,由于DNA常用的荧光染料是EB,而用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,可用带CCD成像头的凝胶成像系统拍摄到,所以透射紫外的波长通常是305nm段。
4、目前,许多厂家设计了双波长的透射紫外灯管(302nm、365nm),其365nm光源主要适用于制备观察以及切割条带,减少对DNA的破坏,并减小对人的伤害。
5、全自动凝胶成像分析系统紫外反射灯源,一般为选配件,主要原因是其使用并不广泛,只是在非透明材质的DNA跑胶载体如纸层析等的成像才需要使用。往往比较常用的还是透明的琼脂糖凝胶与聚丙烯酰胺凝胶,透射光源*可以满足,所以大部分厂家都只将紫外反射光源作为选配,只是在仪器上预留了位置与接口。
6、还有需要指出的是抽拉式托盘的使用,由于化学发光成像无需任何光源,属自发光成像,但由于化学发光的信号比较微弱,不稳定,同时化学发光凝胶成像系统的镜头往往是手动聚焦,所以需要一个高度可调的托盘专门供化学发光成像使用。
7、除此之外,提到全自动凝胶成像分析系统的三色LED灯光源是3个高光强反射激发器(475纳米,、534纳米、632纳米),为多色荧光成像系统的比不可少的组成部分。Fluorchem HD2 的DE-500暗箱还预留连续波长光源光纤接口,以便于将来扩展至连续波长光源(激发光的波长范围400-750nm),涵盖了一些需要特殊激发光的荧光,多应用于多色荧光(Cy3/Cy5)和活体成像。
全自动凝胶成像分析系统采用技术的紫外和白光传输,因此传输光源更均匀分布的光,zui大限度地消除了光密度不均所造成的影响的结果。 图像分析系统的基础是质量,未知样品的立场的基础上的地图可作定性分析,我们可以判断的组成和性质的。