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浅谈层析实验中的气泡问题(一)
  • 发布日期:2022-06-24     信息来源:      浏览次数:215
    • 那么下面上海嘉鹏科技有限公司为大家简单介绍一下浅谈层析实验中的气泡问题(一):
             说到气泡,你可能会联想到酣畅淋漓的可乐,通透上头的啤酒,亦或是流光飞舞的浪漫,生活中的气泡,似乎还带有那么一丝美好,然而对于实验来说,尤其是在大多不会配置在线脱气单元的FPLC系统上做的层析实验,气泡就如烦人的苍蝇,鞋里的石子,令人如鲠在喉不吐不快,如若是重要样品、昂贵填料,气泡带来的实验失败那简直是小型灾难现场。那么气泡是源自何来,而又去之何处,怎么能让它们从我们的系统里消失,以下此篇,做一个小小探讨,抛砖引玉,共谋对策而灭之。



      关于气泡来源,正如病从口入,无非就是进入系统的开口处:流动相,或者流路中相对负压处的漏点;如果流动相脱气不理想或仪器本身连接管路、组件存在问题,流路中将形成肆意妄为的气泡,引发一系列问题: 

            1. 组分峰面积变化,峰形变化;
            2. 形成尖峰或锯齿状噪声;
            3. 出现鬼峰 ,基线漂移波动增大;
            4. 泵动作失常,压力波动,检测基线全抖;
            5. 填料走空,干柱;
            6. 溶解氧可能氧化样品组分和(或)流动相及固定相组分,使检测失真。

      实际案例




      Fig.1 气泡造成的UV杂峰

      Fig.2 气泡造成的系统压力波动


            这些症状基本能覆盖大部分的层析实验问题,可见气泡的破坏力和恼人程度,知己知彼方才能有的放矢,那么气泡是如何形成的呢?流动相中气体形成的原因有多种,*根本的还是由于气体在液体中达到过饱和状态;平衡状态时溶解空气的量与溶液的性质、气体的种类有关,也与外界条件有关, 主要的外界条件有以下 3 种。






      一般来说,溶剂中能溶解气体的量随温度的升高而降低,而当溶剂从低温状态下移至高温时,过量溶解的气体以气泡形式逸出。因此,缓冲液温度的变化,较易引起气泡的形成。

      ● 正如我们配置的缓冲液很多时候会保存于层析柜的低温环境,当实验需要使用时从层析柜中取出,在室温环境下会带来温度的剧烈变化,改变气体溶解性,进而产生气泡,影响实验,因此缓冲液的使用如果有温度的变化需要在实验温度下摆放一段时间,释放气泡后再使用
      ● 如果层析仪器是在非恒温实验室,昼夜会有温差,白天做完实验系统保存,经历夜晚的温度变化,第*二天系统里很可能会出现气泡,此时实验之前充分System wash就非常重要,需要使用高流速将系统内的气泡吹扫出来,避免影响实验。


      ● 当检测器池处于较高温度时,池中易产生气泡,因为液流通过检测器时,温度升高而此处的压力反而减小。如果气泡形成于检测器池中,则将出现尖峰状或锯齿状的基线噪声,甚至于完全无法测定,因此在系统流路中,升温组件与流路保持相应的温度隔断,系统流路温度的均一性,也非常重要。


      以上就是上海嘉鹏科技有限公司为大家整理总结关于浅谈层析实验中的气泡问题(一)。

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