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蛋白纯化系统的常规操作方法
  • 发布日期:2026-11-09     信息来源:      浏览次数:4
    • 蛋白纯化系统是基于层析技术实现蛋白质、多肽、核酸等生物分子自动化分离纯化的核心设备。

      产品特点:
      无需预热,开机基线即可平衡;
      高清10.1寸触摸屏工业电脑小巧紧凑;
      配置高灵敏的固定波长紫外检测器;
      中英文操作界面可互换,操作简单,易于学习和使用;
      可根据您的需求预设程序进行操作;
      数据实时自动保存,可防止意外断电导致的数据丢失;
      采用高精度的恒流泵,流速精度可达±1.2%;
      实验数据支持Excel导出;
      支持馏分收集器全收集、AU值以及电率导收集(选配)。
      开机与系统自检:
      依次打开纯化系统主机电源、配套电脑电源。
      等待主机面板指示灯完成自检,白灯常亮代表硬件就绪。
      双击打开配套控制软件,建立设备通讯连接。
      样品与缓冲液前置处理:
      所有缓冲液、样品必须经‌0.22μm滤膜‌抽滤除杂,避免颗粒堵塞流路和层析柱。
      缓冲液使用前低频超声脱气10分钟,防止管路中产生气泡干扰紫外检测基线。
      样品4℃下13000rpm离心10分钟,取澄清上清备用,避免细胞碎片残留。
      管路预冲洗与参数设置:
      将A泵管路入口放入平衡缓冲液,B泵入口放入洗脱缓冲液。
      执行泵冲洗程序,分别冲洗A、B泵管路,排出管路内残留的乙醇或纯水。
      设置系统流速,参考层析柱说明书设定‌柱前压力上限‌,避免超压损坏填料。
      层析柱安装与系统平衡:
      待管路出口稳定流出无气泡的液体后,连接层析柱上端接口,再连接下端出口至紫外流动池。
      全程保证液液相接,绝对禁止空气进入层析柱,否则会严重破坏分离效果。
      以5~10倍柱体积的平衡缓冲液冲洗柱子,等待紫外吸收、电导率数值稳定,基线走平。
      执行紫外自动调零操作,确保后续峰形检测准确。
      上样与层析运行:
      二选一上样方式:进样环注射器上样,或切换A泵入口直接泵入样品。
      上样完成后,用平衡缓冲液冲洗流路,直至紫外吸收值回到基线,洗去未结合的杂蛋白。
      按预设工艺执行洗脱程序,可选择分步洗脱或线性梯度洗脱,同步开启自动组分收集功能。
      可设置按固定体积收集,或按紫外峰触发自动收集,精准捕获目标蛋白组分。
      实验后清洗与关机:
      先将A、B泵入口切换至超纯水,冲洗5~10倍系统死体积,置换管路内的盐溶液。