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想了解基因扩增仪的工作原理看此文就行
  • 发布日期:2021-12-07     信息来源:      浏览次数:106
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        基因扩增仪性能能满足不同工作环境的多种需求。可用作以聚合酶链式反应为特征的、以检测DNA/RNA为目的的各种病原体检测及基因分析。基因扩增仪广泛应用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域。
       

       

        基因扩增仪的工作原理:
       
        1、基因扩增的基本要素
       
        基因扩增的基本要素与DNA复制的基本要素是一致的。
       
        ①DNA模板:待拷贝的DNA称为模板,它可以是双链DNA也可是单链DNA,Z后扩增得到的产物是双链状态的。
       
        ②引物:是DNA复制的先锋,就象结晶过程中的晶核,引导DNA的合成。在PCR扩增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
       
        ③DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶):是DNA复制的动力,在dNTP等底物存在时在引物的引导下沿着模板DNA合成互补的DNA链。
       
        ④缓冲液:提供DNA合成反应所需的pH,离子强度等环境。
       
        ⑤4种单核苷酸:dNTP,提供DNA合成原料。
       
        2、基因扩增仪原理
       
        基因扩增仪是利用PCR技术对特定基因做体外的大量合成,用于以检测DNA/RNA为目的的各种基因分析。
       
        PCR反应一般设置20~40次循环,每一循环包括高温变性、低温退火、中温延伸三步反应。每一循环的产物作为下一个循环的模板。PCR的扩增效率很高,如果循环次数是30次,那么新生DNA片段理论上达到230拷贝(约为109个分子)。PCR反应每个循环的三个基本反应步骤如下:
       
        ①模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA产物解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
       
        ②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
       
        ③引物的延伸:温度升到7。

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