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琼脂糖凝胶电泳涉及的步骤
  • 发布日期:2021-05-11     信息来源:      浏览次数:239
    • 那么下面上海嘉鹏科技有限公司为大家简单介绍一下关于琼脂糖凝胶电泳涉及的步骤:

       为了制备凝胶,将琼脂糖粉与电泳缓冲液混合至所需浓度,并在微波炉中加热使其熔化。

      琼脂糖凝胶浓度

      1. 所用琼脂糖的百分比取决于要分离的片段的大小。

      2. 琼脂糖的浓度是指琼脂糖相对于缓冲液体积的百分比(w / v),琼脂糖凝胶通常在0.2%至3%的范围内。

      3. 琼脂糖浓度越低,DNA片段迁移越快。

      4. 通常,如果目的是分离大的DNA片段,则应使用低浓度的琼脂糖,如果目的是分离小的DNA片段,则建议使用高浓度的琼脂糖。

      将溴化乙锭添加到凝胶中(**终浓度为0.5 ug / ml),以促进电泳后DNA的可视化。

      将溶液冷却至约60°C后,将其倒入装有样品梳子的浇铸盘中,使其在室温下固化。

      凝胶固化后,将梳子移开,注意不要撕裂孔的底部。

      仍在塑料托盘中的凝胶水平插入电泳仪并用缓冲液覆盖。

      然后将含有DNA与上样缓冲液混合的样品吸移到样品孔中,将盖子和电源线放在设备上,并施加电流。

      可以通过观察电极上的气泡确认电流。

      鉴于其负电荷,DNA将迁移至通常为红色的正电极。

      . DNA迁移到凝胶中的距离可以通过肉眼监测跟踪染料(如溴酚蓝和二甲苯氰染料)的迁移来判断。

       

      以上就是上海嘉鹏科技有限公司为大家整理总结关于琼脂糖凝胶电泳涉及的步骤。

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