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实时荧光定量PCR技术在卫生应急中的应用
  • 发布日期:2020-03-16     信息来源:      浏览次数:291
    • 实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction简称Real Time PCR,如果用于RNA检测,这被称为逆转录实时PCRReal-time RT-PCR)是实时PCR法,它是指对DNA或经过反转入(RT-PCR)的RNA通过聚合酶链式反应并实时监测DNA的放大过程,在扩增的指数增长期就测量扩增产物,因为扩增指数增长期测量值与特异DNARNA)起始量存在相关性,从而实现定量检测。

      Real Time PCR的基本目标是测量和鉴别非常微量的特异性核酸,从而可通过监测CT值而实现对原始目标基因的含量定量。目前被普遍使用的多种常规PCR方法如各种凝胶电泳PCR法,终点荧光定量法或PCR-ELISA法叫做终点PCR法。实时荧光定量PCR法大的点是克服了终点PCR法进入平台期或叫饱和期后定量的较大误差,实现DNA/RNA的定量。

      普通PCR技术发明于1983年,而实时荧光定量PCR技术发明于上世纪九十年代并于1996年生产出了上第台实时荧光定量PCR仪,实时荧光定量PCR技术得以实现的技术要素主要有荧光定量PCR试剂盒和实时荧光定量PCR仪,我荧光定量PCR试剂盒研发实力强大,生产厂较多,临床诊断的品种如HBV/HCV及禽流感诊断试剂盒性能良、供应充足,基本实现产化。在猪流感病毒RNA核酸序列明确的情况下,利用现有的试剂研发平台,人感染猪流感实时荧光定量PCR诊断试剂盒很快就会面世。实时荧光定量PCR仪由于技术含量,只有少数几中企业有能力生产如西安天隆科技有限公司生产的TL-988系列仪器不但取得了发明、科学技术奖、重点新产品证书、医疗器械注册证,而且被发改委确立为技术产业化示范工程2008年生物医学工程专项,产品性能达到际先进水平,在乳品检测行业市场占有率比进口仪器还[1-3]。实时荧光定量PCR仪应用广泛,1999年开始,西方发达尝试将PCR应用于临床传染病诊断、食品安全检测以及血液筛查,目前已相当普及。20081213日中卫生部下发《卫生应急队伍装备参考目录》(卫办应急发[2008]207号),其中要求县以上卫生应急队伍建设中必须配备PCR仪和实时荧光定量PCR仪作为传染病控制类装备。

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