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超微量分光光度法的定义以及应用特点
  • 发布日期:2020-03-11     信息来源:      浏览次数:479
    • 那么下面上海嘉鹏科技有限公司为大家简单介绍一下关于超微量分光光度计的定义以及应用特点:

      定义: 超微量分光光度法是利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质或测定其含量的分析检测技术。

      应用: 生物化学研究中广泛使用的方法之一,广泛用于糖,蛋白质,核酸,酶等的快速定量检测

      特点: 灵敏、准确、快速和简便,在复杂组分系统中,不需要分离,即能检测出其中所含的极少量物质。

      一.超微量分光光度计的原理

      当光线通过某种物质的溶液时,透过的光的强度减弱。因为有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被组成此溶液的物质所吸收,只有一部分光可透过溶液。

      入射光 =  反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透过光

              如果我们用蒸馏水(或组成此溶液的溶剂)作为“空白”去校正反射、分散等因素造成的入射光的损失,则:

      入射光 = 吸收光 十 透过光

       分光光度计进行样品浓度测定的原理是根据朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律,

      A = ε b c

          其中,A ——为物质的吸光度;

                ε——为物质的吸光系数;

                b——为光路长度(光程);

                c——为物质的浓度。

      二.超微量分光光度计的光谱范围

      包括波长为380~780 nm的可见光范围和波长为200~380 nm的紫外光范围。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。

         氘灯的发射光谱:氘灯能发出190~400 nm波长的光谱,可作为紫外光光度计的光源。氙气闪光灯的发射光谱:氙灯能发出200~850 nm波长的光谱,可作为紫外-可见光光度计的光源。电源体积较小,采用脉冲闪光方式工作,闪光次数可达109次,寿命相对氘灯和钨灯较长。

         钨灯的发射光谱是:钨灯光源所发出的380~820nm波长的光谱,光通过三棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。

      物质的吸收光谱:如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液,此时在屏上所显示的光谱已不再是光源的光谱,它出现了几条暗线,即光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失,这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱。

      同物质的吸收光谱是不同的。因此根据吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质。    

      以上就是上海嘉鹏科技有限公司为大家整理总结关于超微量分光光度计的定义以及应用特点。

       

       

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