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对于自动低压液相色谱的使用情况分析概述讨论
  • 发布日期:2017-07-17     信息来源:      浏览次数:1017
    •      在自动低压液相色谱方法开发过程中,采用等度洗脱时,先洗脱组分的色谱峰峰宽较窄,后洗脱组分的色谱峰峰宽较宽;而梯度洗脱方式,则具有分析时间短(特别是对于样品组分复杂的情况来说),在梯度范围内各色谱峰的峰宽近乎一致等特点。

          在化学发展中,化合物性能与结构的确定有着重要的历史地位,尤其是有机、高分子化合物结构的确定更是影响着化学发展的进程,所以说,液相色谱也有着同样重要的历史意义。液相色谱的出现、发展和完善过程直接影响着有机、高分子化合物的分离和分析,从而推动了化学学科的发展。
          自动低压液相色谱由输出泵、进样装置、色谱柱 、梯度冲洗装置、检测器及数据处理和微机控制单元组成。输出泵的功能是将冲洗剂在高压下连续不断地送入柱系统,使混合物试样在色谱中完成分离过程。常用的进样方式有3种:注射器隔膜进样、阀进样和自动进样器进样。自动低压液相色谱的功能是将混合物中各组分分离。梯度冲洗又称溶剂程序,通过连续改变冲洗剂的组成,改善复杂样品的分离度,缩短分析周期和改善峰形,其功能类似于气相色谱中的程序升温。检测器的功能是将从色谱柱中流出的已经分离的组分显示出来或转换为相应的电信号,自动低压液相色谱主要有紫外吸收检测器、荧光检测器、电化学检测器和折光示差检测器,其中以紫外吸收检测器使用zui广。现代化的仪器都配有计算机,以实现自动处理数据、绘图和打印分析报告。
          基质或者样品组分比较复杂时,自动低压液相色谱zui常用的操作模式,而主要在梯度洗脱中出现的鬼峰是特别让人头疼的。有可能由于来源排查不清以及解决方案不到位而导致原来的方法在实际的应用与转移过程中出现问题,甚至面临重新开发方法的尴尬境地。鬼峰意即来源不清,不可指认,时有时无,对目标峰或者样品纯度测试产生干扰作用的峰,即为典型的鬼峰,一般来讲,鬼峰的出现与色谱柱无关(当然,梯度洗脱时,梯度设置不合适的情况除外)。
          自动低压液相色谱对于含量或者纯度检测方法而言,在主峰位置或附近出现鬼峰的话,影响到方法的专属性以及检测结果准确性。特别地,对于药物制剂或者API的纯度测试来说,自动低压液相色谱要求对降解产生的杂质之外的杂质来源做出较详细的说明(如反应副产物或者反应原料带入等)。鬼峰的出现,可能增加此项工作的难度与工作量。

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