网站首页  ◇  技术支持  ◇  凝胶成像分析系统硬件软件的发展史
凝胶成像分析系统硬件软件的发展史
  • 发布日期:2017-05-09     信息来源:      浏览次数:2939
    •      

          凝胶成像由CCD摄像系统和暗箱组成的硬件和不断发展的计算机软件组成。

          1.硬件的发展

          (1)CCD影像系统:这是凝胶成像分析系统的核心装置。CCD是一种矽晶片,能将光的影像元素转换为电子量,使影像数值化以后作为电脑影像处理或储存。
          ccD有videoCcD相机和高性能ccD相机两种。前者即电视规格摄像机,通常用于一般影像分析,但无数值影像处理功能。后者为科学用CCD系统,可以获得高解析度,高动态范围,低噪声的影像,特别是近几年使用的冷却式ccD摄像系统,大大降低了暗电荷,几乎达到无噪声的境界。其分辨率可以从几十万达到几百万个图像元素。

          (2)暗箱:现代已由简单的紫外线uV透射暗箱发展成为多功能的暗箱,箱内双侧安装白灯,可以进行反射分析,也可以安装254衄反射uV灯,用于TLC板分析,黑板上搁置白板,可以进行白光透射的测量。

          2.软件的发展

          针对生命科学的多种实验要求,不断发展升级的计算机软件,是凝胶成像分析系统成为当代生物化学与分子生物学实验研究*的主要设备原因。
          (1)1D区带分析:一维软件可分辨50多条区带,根据峰图显示,可以准确的选定峰值,删除泳带的拖尾现象,获得比较准确的积分吸光度,进行定量计算,如图一蛋白质的分析。

      蛋白质的分析图像

          (图一)蛋白质的分析图像

          (2)分子量(MW)与迁移率(RF)的计算:电泳和层析形成的区带和斑点,其RF值可以自动进行测定计算。蛋白质和核酸(DNA和RNA)的MW,在有标准分子量的区带存在下,可以直接自动计算。蛋白质的标准分子量一般有高、中、低三种,DNA的标准分子量有DNAEcoRⅠ和DNAHindⅢ及100b kb等几种。若软件内无所需的标准时,可重新编辑输入。如图二与表1 DNA的分析结果。

      酵母染色体DNA的分析图像

          (图二)酵母染色体DNA的分析图像(泳道1为标准DNA分子量)


       

          (3)斑电的分析有圆形和矩形分析两种方法。据斑点大小,可以调整半径、长短边,获得每个斑点积上的积分光密度。

          (4)2D点密度分析,是近年来针对生命科学发到后基因组时代,出现的蛋白质组分析设计的软件此软件可选定区域设定灰度、计算光密度、确定像素对上千个双向电泳斑点进行量的分析。如图三对双向电泳的分析。更高一级2D软件,能自动识别、定量比较2D蛋白质凝胶图像,自动计算2D凝胶匕蛋白质点的分子量和PI值,进行蛋白质匹配,与自动切割蛋白质点工作站相连接,快速进行蛋白质组的分析。




      (图三)蛋白质的双向电泳